Hvad er phenolekstraktion?

Phenolekstraktion er en videnskabelig proces udvinde ren ribonukleinsyre (RNA) og deoxyribonukleinsyre (DNA) fra en bestemt celleprøve. Processen hovedsagelig involverer adskillelse eller fjernelse af proteinerne fra cellen, efterlader DNA og RNA. Overalt i verden, phenolekstraktion er den mest udbredte metode til ekstraktion af rene prøver af DNA og RNA.

Processen med phenolekstraktion begynder, når den kemiske forbindelse phenol indføres i celleprøven, der normalt sidder i en vand-blanding. Ligesom olie, er phenol kemiske struktur ikke gør det muligt at let blandes i med vand, så det vil synke ned lige under vand, da phenol er tættere. Chemists vil derefter blande de to faser - vandet og phenol - midlertidigt at skabe en emulsion.

Mens phenol er inde det vandige lag, det vil tiltrække protein elementer celleprøven og bryde dem ned. DNA eller RNA, i mellemtiden, vil forblive ubrudt inde i vandfasen. Derefter vil beholderen i hele blandingen sættes i en maskine kaldet en centrifuge, hvilket vil bidrage adskille blandingen i de to oprindelige faser, phenol og vand. Når blandingen separeres ville kemikere udtrække vand indeholdende DNA eller RNA, mens phenol fase kasseres. DNA'et undergår et yderligere ethanoludfældning til "de-salt" det og gøre det mere koncentreret.

Valg phenol til DNA-ekstraktion sker, fordi forbindelsen er et ikke-polært molekyle, mens både DNA og vand er sammensat af polære molekyler. I kemi, hovedreglen er de polære molekyler bedst opløses i polære molekyler, og ikke-polære molekyler kan nemt opløse ikke-polære molekyler. Dette betyder, at mens phenol opløser proteinet under phenolekstraktion, vil det ikke opløse DNA eller RNA, således at de bevarer deres struktur og kan udvindes ud af vandet. Phenol er så effektiv til at opløse proteiner, som sidstnævnte vil blive permanent opdelt.

I en phenolekstraktion, surheden af ​​hele blandingen er vigtig for effektivt at ekstrahere DNA og RNA. Chemists anbefaler, at phenolen bør have en pH-værdi over 7, således at vandlaget succes kan samle DNA. Ved en pH-værdi på 4,5, der allerede betragtes sure, kan RNA allerede indsamles af vandfasen. For at ændre phenol surhedsgrad eller alkalinitet, er nogle kemikalier tilsættes, såsom forbindelsen tris eller N-ethylmorpholin.

  • Polære molekyler opløses bedst i polære molekyler.
  • Phenolekstraktion anvendes til at ekstrahere RNA og DNA fra en specifik celleprøve.
  • Chemists bruge phenolekstraktion, når der arbejdes med DNA og RNA.

© 2019 Zajacperrone.com | Contact us: webmaster# zajacperrone.com