ELISA procedure begynder i klinikken med en blodprøve tages fra patienten. Et antal trin er derefter fulgt ved anvendelse testkit ELISA i laboratoriet. Testen vil detektere tilstedeværelsen af antistoffer eller antigener til en sygdom, såsom HIV, i blodet. Trinene omfatter tilsætning af forskellige stoffer og vask og resultaterne er generelt målt ved en farveændring.
Enzym-linked immunosorbent assay (ELISA), som også benævnes enzymimmunoassay (EIA), anvendes som en diagnostisk test. Det er mest kendt som en diagnostisk test for HIV. Testen plade består normalt af 96 små brønde, i hvilke et specifikt antigen er immobiliseret. Hvis antistoffet er til stede i serumprøven, vil det binde til antigenet, tillader detektion via de forskellige trin af ELISA-proceduren.
Det første skridt i ELISA procedure er at opnå en prøve fra patienten. Dette gøres af en sygeplejerske under sterile betingelser. Blodet er normalt taget fra en vene i armen eller hånden. En årepresse er placeret på armen til at svulme venen og gøre proceduren lettere og huden renses, hvor nålen skal indsættes. En lille pik kan mærkes som nålen går i og blodet vil blive indsamlet i et sterilt rør.
Efter blodprøven tages, overføres til laboratoriet, hvor resten af ELISA procedure vil blive udført af en laborant. Blodprøven først tilsat til brøndene i ELISA-pladen. Hvis det specifikke antistof er til stede, binder til antigenet. Pladen vaskes derefter under anvendelse af en puffer, for at fjerne ubundne antistoffer.
Et andet antistof, normalt af animalsk oprindelse, som har et enzym, der er knyttet til det, tilsættes derefter, som vil binde til antistof-antigen-komplekset. Pladen vaskes igen, for at fjerne overskydende. Enzymet er farve-reaktivt, når et substrat tilsættes ved slutningen af ELISA-proceduren. Det er måling af graden af farveændring, der giver resultatet.
ELISA procedure skal følges nøje for at undgå falske resultater. I de fleste ELISA-plader en positiv og negativ kontrol er inkluderet, for at minimere sådanne falske resultater. Ved test for HIV, vil et positivt resultat som regel blive fulgt op af en anden, bekræftende, test, ofte af en anden type, såsom en Western Blot.
- Det første trin i ELISA procedure kræver ofte sætte en årepresse på en arm, for at opnå en blodprøve.